体外血栓形成：

使用健康普通级新西兰兔，根据试验用血量进行心脏采血。采血后即向阴性对照管加入血液，每管加入1.8mL，再加入0.2mL3.2%柠檬酸钠溶液，混匀备用。剩余的血液按25:1的比例加入3.2%柠檬酸钠溶液进行部分抗凝，混匀后向供试品管、参照品管和空白对照管交叉加入2ml部分抗凝血液，使材料全部被血液浸没，室温静止5～20min，期间观察供试品管、参照品管和空白对照管中血液的变化，待供试品管、参照品管或空白对照管内形成部分血栓时，即向供试品管、参照品管和空白对照管交叉加入0.1%肝素钠溶液200µL，混匀。室温静止10～15min后，将供试品管、参照品管、空白对照管和阴性对照管中的血液取出，置于冷冻离心机中，在4℃，2000g离心力条件下离心5min，取各管血浆用全自动凝血分析仪测定Fib含量。（注：Fib含量越低，说明血栓形成的量越多。）离心取血浆后，观察各管血栓形成的情况。

凝血酶原时间：

1、新鲜抗凝兔血制备：使用健康普通级新西兰兔，根据试验用血量进行心脏采血，按9:1的比例加入3.2%枸橼酸钠溶液进行抗凝，混匀，制备成新鲜抗凝兔血。

2、 向供试品管、参照品管和空白对照管中分别加入2.0mL新鲜抗凝兔血，使材料全部被血液浸没，混匀后放入台式恒温摇床中，在（37±1）℃条件下，60r/min动态接触15min。15min后取出所有试管，混匀后分离到新的聚丙烯塑料管，置于离心机中， 2000g离心5min，分离出血浆，取血浆用全自动凝血分析仪测定其PT值。

部分凝血激活酶时间：

1、贫血小板血浆（PPP）制备：使用健康普通级新西兰兔进行心脏采血，按9:1的比例加入3.2%柠檬酸钠溶液进行抗凝，充分混匀，制备成普通级新西兰兔新鲜抗凝全血，将抗凝全血以 2000g离心5min，分离出PPP。

2、将供试品管、参照品管、阳性对照管和空白对照管中分别加入2mL的PPP，使材料完全被浸没，混匀后放入台式恒温摇床中，在（37±1）℃条件下，60r/min动态接触15min。15min后从管中分离出血浆，用全自动血凝分析仪分别测定各管PTT值。

血小板粘附

1、新鲜抗凝兔血：使用健康普通级新西兰兔，用含EDTA-K2抗凝剂的采血管根据试验用血量进行心脏采血，混匀，制备成新鲜抗凝兔血。

2、取1g直径1mm的玻璃珠，填入一根直径3mm、长120mm的聚四氟乙烯管中，两端分别用直径3mm、长20mm硅橡胶管嵌接。在嵌接处用直径2mm、长2mm的聚四氟乙烯管与一层尼龙网（160目）于聚、硅两管之间，以防玻璃珠漏出。制备3个玻璃珠柱为空白对照组；将玻璃珠涂以2%甲基硅油，按空白对照制备方法一致制备3个涂硅玻璃珠柱，作为阴性对照组。将供试品按0.2g/mL的比例，制成供试品溶液注入玻璃珠柱内，充满后驱出多余溶液，反复2次，经干燥后制备3个柱，作为供试品组。

3、取新鲜抗凝兔血0.5ml各3次，接着将血液以0.5ml/15s的速率通过各柱，分别对未通过及已通过玻璃珠柱的血液做血小板计数。

血小板计数

1、新鲜兔血制备：使用健康普通级新西兰兔，根据试验用血量进行心脏采血，用EDTA-K2进行抗凝，充分混匀后待用；

2、向供试品管、参照品管和空白对照管分别加入2mL 新鲜兔血，使材料全部浸没，充分混匀后放入台式恒温摇床上，在（37±1）℃条件下，60r/min动态接触15min。15min后取出所有试管，充分混匀，分离管中血液到新的聚丙烯塑料管，在全自动五分类血细胞分析仪上测定血小板数量。

白细胞计数

1、新鲜兔血制备：使用健康普通级新西兰兔，根据试验用血量进行心脏采血，用EDTA-K2进行抗凝，充分混匀后待用。

2、向供试品管、参照品管和空白对照管分别加入2mL新鲜抗凝兔血，使材料全部被血液浸没，混匀后放入台式恒温摇床上，在（37±1）℃条件下，60r/min动态接触15min 。15min后取出供试品管、参照品管和空白对照管，混匀，分离供试品管、参照品管和空白对照管中的血液到新的聚丙烯塑料管，最后用显微镜观察供试品管、参照品管和空白对照管分离后管中血液的白细胞形态，用全自动血细胞分析仪检测供试品管、参照品管和空白对照管分离后管中血液的白细胞数量。

溶血实验

1、供试品组每管加入供试品5g，再加入氯化钠注射液10mL；阴性对照组每管加入氯化钠注射液10mL；阳性对照组每管加入蒸馏水10mL。每组平行操作3管。

2、全部试管放入恒温水浴中（37±1）℃保温30min后，每支试管加入0.2ml.稀释兔血，轻轻混匀，置（37±1）℃水浴中继续保温60min。倒出管内液体以800g离心5min。

3、吸取上清液移入比色皿内，用分光光度计在545nm波长处测定吸光度。

补体激活试验

1、新鲜兔血清：使用健康普通级新西兰兔，根据试验用血量进行心脏采血，置于聚丙烯管中，室温血液自然凝固后置于离心机中，2000g离心5min，分离血清备用。

向供试品管、参照品管和空白对照管中分别加入2mL新鲜兔血清，然后将其放入恒温水浴锅中，在（37±1）℃条件下孵育60min，取出各组试管并置于冰浴中以阻止补体的进一步活化，然后将各管中的血清分离至新的聚丙烯管中，按照兔C3a酶联免疫分析（ELISA）试剂盒的说明书进行操作，使用酶标仪在450nm波长处测定各孔吸光度值，根据吸光度值计算出供试品组、参照品组和空白对照组C3a的含量。